利用SMART技术构建歪头菜叶片全长cDNA文库

编号 zgly0001617818

文献类型 期刊论文

文献题名 利用SMART技术构建歪头菜叶片全长cDNA文库

作者 韩瑜  强维亚 

作者单位 草地农业生态系统国家重点实验室兰州大学生命科学学院 

母体文献 草业科学 

年卷期 2014年01期

年份 2014 

分类号 Q943.2 

关键词 歪头菜  cDNA文库  SMART技术 

文摘内容 以歪头菜(Vicia unijuga)为研究材料,用Trizol试剂提取歪头菜叶片组织总RNA,用SMART TM cDNA Library Construction Kit构建cDNA文库。经测定,初级文库滴度达到2.3×106 pfu·mL-1,扩增后文库总滴度为6.2×109 pfu·mL-1,重组率为92.7%。从扩增后的文库随机挑取16个噬菌斑进行PCR扩增鉴定,结果显示,插入片段大多分布在500~2 500bp。用PCR法从该文库中扩增出了以往用RACE法克隆出的歪头菜木质素合成相关基因CAD3′端全序列。通过各项指标验证成功构建了歪头菜叶片全长cDNA文库。