小反刍兽疫病毒N基因的原核表达

编号 zgly0001400401

文献类型 期刊论文

文献题名 小反刍兽疫病毒N基因的原核表达

作者 阮洋  秦峻岭  高玉伟  孙玮  张涛  杨玉姣  杨松涛  王承宇  王铁成  黄耕  夏咸柱 

作者单位 吉林农业大学动物科学技术学院  军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室  吉林大学畜牧兽医学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2011年03期

年份 2011 

分类号 S852.65 

关键词 小反刍兽疫病毒N基因  原核表达  SDS-PAGE电泳  Western-blot 

文摘内容 目的是表达出小反刍兽疫病毒的核蛋白,并鉴定其活性。根据GenBank发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列,对其进行基因优化并合成。设计引物,利用PCR的方法扩增PPRV-N基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建原核表达载体pET-28a-N。阳性质粒转化原核表达宿主菌Transetta(DE3),用IPTG诱导表达并确定表达N基因的最佳诱导时间、温度。通过SDS-PAGE电泳和Western blot分析确定表达蛋白的表达量和活性。扩增出PPRV-N基因,构建的原核表达载体pET-28a-N和原核表达菌,表达了N蛋白,表达蛋白能与PPRV阳性血清发生特异性反应。