H3N2亚型犬流感病毒NP蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备

编号 zgly0001541724

文献类型 期刊论文

文献题名 H3N2亚型犬流感病毒NP蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备

作者 王晓丽  毕振威  王永山  潘群兴  欧阳伟  夏兴霞  诸玉梅 

作者单位 江苏省农业科学院兽医研究所 农业部兽用生物制品工程技术重点实验室 国家兽用生物制品工程技术研究中心 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2017年01期

年份 2017 

分类号 S852.655 

关键词 犬流感病毒  H3N2亚型  核蛋白  原核表达  多克隆抗体 

文摘内容 将分离的H3N2亚型犬流感病毒(Canine influenza virus,CIV)A/Canine/Nanjing/11/2012(H3N2)株的核蛋白(NP)基因克隆至原核表达载体p ET28a(+)中,构建重组表达质粒p ET-NP,然后转化大肠杆菌E.coli Rosetta(DE)感受态细胞,经IPTG诱导后,采用SDS-PAGE和Western blot进行分析。结果显示,大肠杆菌表达的重组NP蛋白的分子量约为61 k Da,与预期相符,并能与犬CIV阳性血清发生特异性反应。将表达的重组NP蛋白进行纯化后,免疫大白兔制备抗NP蛋白多克隆抗体血清,Western blot检测该血清可与CIV的NP蛋白发生特异性反应,间接ELISA检测该多克隆抗体血清的效价达1:30 000,显示了较高的抗体效价。本研究为CIV快速检测方法的建立和流行病学调查奠定了科学依据。