黄粉虫热休克蛋白70基因的克隆、序列分析与表达(英文)

编号 zgly0001459728

文献类型 期刊论文

文献题名 黄粉虫热休克蛋白70基因的克隆、序列分析与表达(英文)

作者 黄琼  胡杰  孙灵  王勤 

作者单位 四川农业大学林学院森林保护学省级重点实验室  四川农业大学经济管理学院  四川农业大学生命科学理学院生物系 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2013年05期

年份 2013 

分类号 S899.9 

关键词 黄粉虫  热休克蛋白  基因克隆  生物信息学  mRNA表达  热激 

文摘内容 为给黄粉虫Tenebriomolitor抗逆机理研究提供理论依据,本研究采用PCR和RACE法从黄粉虫幼虫中克隆出一个热休克蛋白70基因Tmhsp70,并运用半定量RT-PCR法检测其在黄粉虫不同发育阶段的mRNA表达水平。结果表明:克隆出的Tmhsp70序列全长2282bp,具有一个富含A的115bp5’-非翻译区和一个1935bp的开放阅读框及一个富含A、T的232bp3’-非翻译区。5’-非翻译区含有7个热休克元件nGAAn,3’-非翻译区末端有长22bp的Poly(A)尾。Tmhsp70编码的黄粉虫热休克蛋白(TmHSP70)具有3个典型的HSP70特征基序(IDLGTTYS,IFDLGGGTFDVSIL和IVLVGGSTRIPKIQQ)和1个胞质HSP70末端特征基序(EEVD),无信号肽和跨膜区域,包含2个主要的结构域,即:N-端42kDa的高度保守ATPase功能域和C-端18kDa的保守多肽结合功能域。ATPase功能域的三级结构由2个大球形亚功能域组成,具有1个核苷酸结合中心;多肽结合功能域形成1个双层4股β-折叠片样的三明治结构和2个α-螺旋,内含1个多肽结合通道。此外,黄粉虫Tmhsp70mRNA的表达具有热激诱导和发育调控的特征。半定量RT-PCR分析表明,42℃热激1h的黄粉虫各发育阶段Tmhsp70mRNA的表达量上升了1.4～26.9倍。25℃下1日龄黄粉虫蛹中的Tmhsp70mRNA表达量要高于其余各发育阶段的累积表达量;42℃热激1h后90日龄幼虫中的Tmhsp70mRNA表达量最丰富,既高于30日龄和60日龄幼虫中的累积表达量,也高于15日龄和30日龄成虫中的累积表达量。这些结果为进一步研究黄粉虫热休克蛋白的结构、功能和表达调控及其与抗逆性的关系奠定了基础。