抗CMV和ToMV RNAi载体的构建及加工番茄遗传转化

编号 zgly0001480162

文献类型 期刊论文

文献题名 抗CMV和ToMV RNAi载体的构建及加工番茄遗传转化

作者 乔亚红  田桂英  郑银英  崔百明  李诗林  向本春 

作者单位 石河子大学农学院农业生物技术重点实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2014年01期

年份 2014 

分类号 S641.2 

关键词 CMV  ToMV  RNAi载体  加工番茄  遗传转化 

文摘内容 【目的】利用农杆菌介导法将抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12转入红番3号加工番茄,获得抗CMV和ToMV的加工番茄植株,为加工番茄病毒病的防治奠定基础。【方法】采用RT-PCR扩增,选取新疆加工番茄CMV分离物NS0-4 1a复制酶第1 051-1 350bp序列和ToMV分离物SCS-2 130/180ku复制酶第1 920-2 200bp序列,作为干扰片段CR12和To12。通过T克隆载体将CR12和To12连接成拼接片段TC12,构建成含反向重复结构拼接片段的RNAi表达载体pBi35STC12。通过农杆菌介导法,用其转化红番3号加工番茄,经过筛选、PCR检测得到转基因植株。【结果】成功构建了抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12,并用其转化番茄植株,从转化的1 500个愈伤组织中获得33株再生植株,利用PCR对再生植株进行检测,显示从33株再生植株中获得了19株转基因植株,转化率为1.26%。【结论】构建了抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12,用其转化红番3号加工番茄,获得了转基因植株。