葡萄广谱抗病毒RNAi载体构建及对合子胚起源的体细胞胚的遗传转化

编号 zgly0001528801

文献类型 期刊论文

文献题名 葡萄广谱抗病毒RNAi载体构建及对合子胚起源的体细胞胚的遗传转化

作者 田莉莉  牛良 

作者单位 中国农业科学院郑州果树研究所河南省果树瓜类生物学重点实验室农业部果树育种技术重点实验室 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2016年01期

年份 2016 

分类号 S436.631 

关键词 葡萄  抗病毒  RNAi载体  体细胞胚  遗传转化 

文摘内容 病毒病对世界葡萄生产危害严重。为创制广谱抗病毒植物新材料,本研究采用RT-PCR分别克隆获得了葡萄扇叶病毒、葡萄卷叶病毒、葡萄病毒A和葡萄病毒B的外壳蛋白基因保守片段,用重叠延伸PCR方法串联获得了825 bp的大片段GV,以此串联基因片段用作干扰片段,采用Gateway技术构建了同时含有4种病毒CP基因片段的RNAi植物表达载体Ph12-GV,冻融交替法将其转入农杆菌菌株EHA105中。采用根癌农杆菌介导法遗传转化红宝石无核葡萄合子胚诱导发生的体细胞胚,RT-PCR的检测结果显示,目的基因片段成功转入葡萄中并在RNA水平上得到表达。