虎源猫泛白细胞减少症病毒VP2基因主要抗原表位区的原核表达和蛋白纯化

编号 zgly0000728781

文献类型 期刊论文

文献题名 虎源猫泛白细胞减少症病毒VP2基因主要抗原表位区的原核表达和蛋白纯化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 田丽红  华育平 

作者单位 东北林业大学 

母体文献 东北林业大学学报 

年卷期 2010,38(6)

页码 97-100

年份 2010 

分类号 S852 

关键词 猫泛白细胞减少症病毒  VP2基因  抗原表位  原核表达  蛋白纯化  虎 

文摘内容 利用PCR技术从FPV-HLJ株病毒细胞培养物中扩增VP2基因主要抗原表位区片段VP2’。扩增片段克隆至pMD18-T载体,经核苷酸序列测定确认后,亚克隆于pGEX-6p-1原核表达载体,构建pGEX-6p-VP2’重组原核表达质粒。将该质粒转化至表达菌BL21(DE3)中用IPTG进行诱导表达。表达蛋白采用切胶法纯化,并用SDS-PAGE和Westernblot检测纯化蛋白纯度和抗原特异性。结果表明,VP2基因全长1200bp,编码400个氨基酸。重组菌可表达相对分子量约为66kD的融合蛋白,包括目的蛋白40kD和GST标签26kD。该蛋白以包涵体形式存在,且GST融合蛋白具有良好抗原特异性。