编号 zgly0001330399
文献类型 期刊论文
文献题名 陆地棉叶绿体铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与表达(英文)
作者单位 中国农业科学院棉花研究所 中国农业科学院棉花研究所 河南安阳455004河南科技学院生命科技学院 河南新乡453002 河南安阳455004
母体文献 植物生理与分子生物学学报
年卷期 2007年03期
年份 2007
分类号 S562 Q943.2
关键词 棉花 铜锌超氧化物歧化酶 cDNA末端快速扩增 基因表达
文摘内容 以陆地棉‘CRI36’的叶片为材料,使用RACE技术克隆到了棉花叶绿体Cu/Zn-SOD酶基因。基因序列全长共1043bp,含有完整的开放阅读框。推导的氨基酸序列分析显示含有叶绿体信号肽,和已知植物的叶绿体Cu/Zn-SOD酶蛋白的氨基酸残基的同源性在66%~74%之间。基因的表达谱分析显示:棉花叶绿体Cu/Zn-SOD酶基因主要在叶片、茎中表达,根、花和下胚轴中没有检测到信号,即基因的表达主要在棉花的绿色组织。不同生育期的表达谱结果证实:该基因主要在苗期表达,以后表达逐渐减少。用pET-2la(+)构建了原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)的表达结果显示:表达后得到一个29.0kD的新蛋白,其分子量与预期目标一致。对SOD酶活性的分析证实,重组菌的酶活性显著增加,证明克隆的基因具有活性。