一株口蹄疫病毒非结构蛋白3A单克隆抗体的表位肽段鉴定

编号 zgly0001469666

文献类型 期刊论文

文献题名 一株口蹄疫病毒非结构蛋白3A单克隆抗体的表位肽段鉴定

作者 王娜  卢曾军  曹轶梅  李平花  付元芳  孙普  曾巧英  刘在新 

作者单位 甘肃农业大学动物医学院  中国农业科学院兰州兽医研究所  家畜疫病病原生物学国家重点实验室  国家口蹄疫参考实验室 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2014年10期

年份 2014 

分类号 S852.659.6 

关键词 口蹄疫病毒  单克隆抗体  抗原表位 

文摘内容 为鉴定口蹄疫病毒非结构蛋白3A的单克隆抗体3A24#识别的表位区,对非结构蛋白3A分两个肽段进行原核表达,其中3A1和3A2肽段分别包含3A蛋白的第1位~89位和77位~153位氨基酸。分别针对两肽段基因设计并合成引物,PCR扩增后定向克隆到原核表达载体pET-30a(+)-PES-SUMO,将重组质粒转化宿主菌E.coli BL21(DE3)pLys,IPTG诱导表达。用单克隆抗体3A24#对表达的3A1和3A2肽段进行Western blot检测,以鉴定单克隆抗体3A24#的识别表位肽。SDS-PAGE分析表明,成功表达了3A1和3A2肽段,大小分别为26ku和25ku。Western blot分析表明,FMDV牛阳性血清与两肽段均能识别,而单克隆抗体3A24#只能与3A2肽段发生反应,与3A1肽段不发生反应。3A24#单克隆抗体识别的抗原表位位于3A2肽段,即3A蛋白的第89aa~第153aa肽段上。