用于植物基因研究的mCherry表达载体构建及定位表达

编号 zgly0001568006

文献类型 期刊论文

文献题名 用于植物基因研究的mCherry表达载体构建及定位表达

作者 于颖  刘佳欣  周美琪  赵磊飞  王超 

作者单位 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室 

母体文献 植物研究 

年卷期 2017年02期

年份 2017 

分类号 Q943.2 

关键词 mCherry  红色荧光蛋白  植物表达载体构建  细胞定位 

文摘内容 荧光蛋白在生物学研究中具有广泛的应用和重要的作用,其中红色荧光蛋白mCherry因其颜色和良好的特性,对于植物基因研究具有重要的使用价值,本研究将mCherry基因构建到pBI121植物表达载体系统中,构建了pBI121MCS-mCherry载体。利用基因枪转化法转入洋葱表皮进行表达验证,显微镜观察结果显示整个洋葱细胞具有红色荧光,证明该载体能够在植物细胞中表达红色荧光蛋白。利用双酶切连接法将转录因子BpMYB4基因构建到该载体上,得到融合表达载体pBI121MCS-mCherry-BpMYB4,在洋葱表皮中表达,结果显示细胞核具有红色荧光,证明该载体能够准确表达融合蛋白,进行亚细胞定位。同时融合基因时不再需要中间载体,构建简便,引入的KpnⅠ酶切位点,增加了可选择性。因此该载体可用于植物基因表达定位及转基因植株筛选研究中,为今后的白桦基因组学研究提供了材料。