蓝细菌光敏色素Alr1966GAF2及其突变体的表达与光化学性质研究

编号 zgly0001715681

文献类型 期刊论文

文献题名 蓝细菌光敏色素Alr1966GAF2及其突变体的表达与光化学性质研究

作者 马琼  向建伟  牟若兰  邓腊青  王运  周明 

作者单位 湖北民族大学生物资源保护与利用湖北省重点实验室  湖北民族大学生物科学与技术学院  华中农业大学农业微生物学国家重点实验室 

母体文献 植物科学学报 

年卷期 2020年04期

年份 2020 

分类号 Q933 

关键词 蓝细菌光敏色素  顺序可逆光效应  红色荧光蛋白  胆绿素 

文摘内容 采用PCR技术从鱼腥藻(Anabaena sp. PCC7120)中扩增蓝细菌光敏色素基因片段alr1966gaf2,将alr1966gaf2插入到pET-30a(+)载体中,构建表达质粒pET-alr1966gaf2。最后将Alr1966GAF2与HO1、PcyA在E. coli BL21(DE3)中共表达获得色素蛋白Alr1966GAF2,并对该蛋白的光化学性质进行分析。结果显示,色素蛋白Alr1966GAF2结合色素为藻蓝胆素(phycoerythrobilin,PCB)或藻紫胆素(phycoviolobilin,PVB),在3种不同吸收态15Z-P428 nm、中间态和15E-P514 nm之间具有顺序可逆光效应。通过定点突变技术将DXCF基序中的保守性Cys突变为Ala,获得了突变体Alr1966GAF2(C72A)。将Alr1966GAF2(C72A)与HO1、PcyA共表达,获得色素蛋白Alr1966GAF2(C72A)。研究结果表明Alr1966GAF2(C72A)结合色素为PCB,Alr1966GAF2(C72A)-PCB具有较强的荧光活性,其荧光量子的产率高达0.11。Alr1966GAF2(C72A)不仅能够共价结合PCB,还可以结合胆绿素(Biliverdin,BV),均具有较强的红色荧光活性。