温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子调控条件的优化

编号 zgly0000808990

文献类型 期刊论文

文献题名 温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子调控条件的优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 邵海刚  侯亚文  张莹  刘奕彦  许海峰  张洪勤  应俊 

作者单位 温州医学院检验医学院与生命科学学院 

母体文献 中国微生态学杂志 

年卷期 2012(10)

页码 886-888

年份 2012 

分类号 Q78 

关键词 超氧化物歧化酶  启动子  重组PCR  红色荧光蛋白  报告基因  温度 

文摘内容 目的构建大肠埃希菌BL21 Mn-SOD-RFP报告基因载体,并探讨温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子的调控。方法利用重组PCR技术,构建以Mn-SOD启动子调控的红色荧光蛋白(RFP)报告基因载体,将融合基因与T载体连接导入大肠埃希菌中,在不同温度(20、37、40和45℃)培养不同时间(13、20、30、37、44和54 h)后,利用荧光显微镜和荧光光度计观察大肠埃希菌表达RFP的情况。结果正确构建Mn-SOD-RFP融合基因,重组PCR结果与测序结果完全一致;不同温度不同时间诱导后,Mn-SOD启动子在37℃,培养30～37 h表达的红色荧光蛋白最多。结论成功构建该报告基因载体,并完成温度、时间对其调控的优化,为更进一步研究其他因素对SOD基因启动子的调控机制奠定基础。