家蚕丝氨酸蛋白酶BmHP14基因的克隆与表达模式分析

编号 zgly0001433634

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕丝氨酸蛋白酶BmHP14基因的克隆与表达模式分析

作者 李玉欣  亓希武  韩琦  徐云敏  何宁佳 

作者单位 家蚕基因组生物学国家重点实验室西南大学蚕学与系统生物学研究所 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2012年05期

年份 2012 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕  丝氨酸蛋白酶  血淋巴蛋白酶HP14  基因克隆  序列特征  组织表达谱  诱导表达 

文摘内容 家蚕受到外源微生物侵染或损伤时,前酚氧化酶原级联反应中的起始丝氨酸蛋白酶会激活下游信号通路,最终产生黑色素。采用RACE技术,获得了家蚕前酚氧化酶原级联反应起始丝氨酸蛋白酶——血淋巴蛋白酶编码基因的全长cDNA序列,命名为BmHP14(GenBank登录号:JQ954757)。BmHP14 cDNA全长2 508 bp,开放阅读框为2 013 bp,编码670个氨基酸,预测蛋白质分子质量71 kD,等电点5.09,N端17个氨基酸预测为信号肽序列。多重序列比对显示BmHP14与烟草天蛾HP14的相似度很高,达到57%;分子进化树中二者也聚为一支。RT-PCR分析表明,BmHP14在家蚕5龄第3天幼虫脂肪体、马氏管、精巢、卵巢、表皮、血细胞、头部均有表达,其中以脂肪体中的表达水平最高。以黑胸败血芽孢杆菌、大肠杆菌、球孢白僵菌注射侵染家蚕5龄第3天幼虫,Real-time PCR检测显示在受到病菌侵染后,幼虫脂肪体中的BmHP14表达上调。Westernblotting检测结果显示,BmHP14在家蚕体液中以前体和成熟体的形式共同存在。研究结果提示,BmHP14是家蚕前酚氧化酶原级联反应信号通路中的关键酶。