不同保存方法对蜡梅总DNA提取效果的影响及ISSR-PCR验证

编号 zgly0000591267

文献类型 期刊论文

文献题名 不同保存方法对蜡梅总DNA提取效果的影响及ISSR-PCR验证

学科分类 220.99;林学其他学科

作者 靖相密  褚云霞  汤庚国  张永春  刘忠  张慧 

作者单位 上海市农业科学院园艺研究所  南京林业大学森林资源与环境学院  上海市农业科学院林木果树研究所  上海交通大学药学院  上海新冈腊梅花种植有限公司 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2008,6(2)

页码 387-392

年份 2008 

分类号 S792.153  S512.1 

关键词 蜡梅  保存方法  DNA提取  ISSR-RCR 

文摘内容 本文以蜡梅新鲜成熟叶片为对照,比较了真空冷冻干燥、硅胶干燥、压标本干燥、45℃烘干、75℃烘干5种叶片干燥方法和4℃保鲜、-20℃冻存、-70℃冻存法对蜡梅总DNA提取效果的影响。结果表明硅胶干燥的样品提取的DNA完整无降解,纯度高,DNA得率为鲜叶的1/3多,压标本干燥的样品可以提到完整的DNA,DNA得率与硅胶干燥的样品相近,提取的DNA含多酚,纯度低。真空冷冻干燥样品的DNA在冷冻干燥过程中小部分受到损伤,DNA得率较鲜叶稍有下降。45℃烘干的样品可以提取到完整的DNA,纯度高,DNA得率约为鲜叶的1/2,75℃烘干的样品的DNA全部降解。ISSR扩增结果表明75℃烘干的样品提取的DNA没有获得扩增产物,其他4种干燥方法提取的DNA的扩增结果与鲜叶相同。鲜叶可在4℃冰箱保鲜存放6d,在-20℃冰箱中冷藏半月,可在-70℃超低温冰箱中长期放置而不影响总DNA的提取质量和ISSR扩增结果。