白木香基因组DNA提取与ISSR反应体系的优化

编号 zgly0000609157

文献类型 期刊论文

文献题名 白木香基因组DNA提取与ISSR反应体系的优化

作者 邹枚伶  夏志强  王文泉 

作者单位 中国热带农业科学院／热带生物技术研究所 

母体文献 中国农学通报 

年卷期 2009(2)

页码 250-254

年份 2009 

分类号 Q16 

关键词 白木香  DNA提取  ISSR  PCR反应体系 

文摘内容 白木香为瑞香科沉香属植物，是中国特有的珍贵药用植物，也是国产沉香药材唯一资源植物．现已濒临灭绝，被载入《中国植物红皮书》。采用改良CTAB法提取白木香DNA较传统方法简单高效。通过琼脂糖凝胶电泳和OD26D／OD280比值测定，所得基因组DNA纯度高，可作为ISSR等以PCR为基础的DNA多态性标记。通过优化影响白木香ISSR-PCR的主要参数，确立了适用于白木香的ISSR反应体系和扩增条件。结果表明在20ul反应体中，模板DNA、引物、Mg^2＋、dNTP和Yaq DNA聚合酶5种主要成分的最适浓度分别为25ng、0．8umol／L、2．5umol／L、0．2mmol／L、1．0 U，扩增出足量产物至少需要35个循环。