白背飞虱ISSR-PCR反应体系构建的正交设计优化

编号 zgly0001476186

文献类型 期刊论文

文献题名 白背飞虱ISSR-PCR反应体系构建的正交设计优化

作者 谢家楠  郭建军  金道超 

作者单位 贵州山地农业病虫害重点实验室  贵州大学昆虫研究所 

母体文献 植物保护 

年卷期 2014年02期

年份 2014 

分类号 S435.112.3 

关键词 白背飞虱  正交设计  ISSR 

文摘内容 白背飞虱是水稻重要害虫之一。研究采用L16(45)正交设计优化试验,构建了白背飞虱ISSR最优反应体系,并对引物退火温度和反应循环次数进行了优化。结果表明:白背飞虱ISSR-PCR最优反应体系为2μL 10×PCR Buffer(10mmol/L Tris-HCl;50mmol/L KCl),1.5mmol/L Mg2+,0.25mmol/L dNTPs,0.9μmol/L引物,1UTaq Polymerase和50ng模板DNA,ddH2O补充至20μL。本研究采用的10条引物的最佳退火温度在51.0~54.0℃间,以引物相应最优退火温度和40次反应循环可获得较好的白背飞虱ISSR-PCR结果。