苔草属植物ISSR-PCR体系的建立及优化

编号 zgly0000842377

文献类型 期刊论文

文献题名 苔草属植物ISSR-PCR体系的建立及优化

作者 宁花  郑成淑  王文莉  朱翠英  李朝晖  张艳敏 

作者单位 山东农业大学园艺科学与工程学院  作物生物学国家重点实验室  国家苹果工程技术中心  山东农业大学林学院  山东农业大学生命科学学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2014(2)

页码 349-355

年份 2014 

关键词 苔草属  ISSR  分子标记  正交设计  体系优化 

文摘内容 本研究以苔草属植物10个野生种为试材,采用L16(45)正交试验设计,对影响ISSR-PCR反应的Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、引物及模板DNA以及退火温度、循环次数等因素进行优化试验。研究结果表明,苔草属植物的最优ISSR-PCR反应体系,即25μL反应体积中,含Taq DNA聚合酶1.5 U,Mg2+1.5 mmol/L,DNA模板150 ng,引物0.24μmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L。苔草属植物的最佳扩增程序,即:94℃预变性3 min;94℃变性30 s,退火45 s,72℃延伸1.5 min,38个循环;72℃延伸7 min;4℃保存。