根结线虫雌虫ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0001468195

文献类型 期刊论文

文献题名 根结线虫雌虫ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者 思彬彬  张学娟  张靠稳 

作者单位 北方民族大学生物科学与工程学院 

母体文献 中国植保导刊 

年卷期 2014年02期

年份 2014 

分类号 S432.45 

关键词 根结线虫雌虫  ISSR-PCR  正交设计  单因子 

文摘内容 以根结线虫雌虫DNA为基础,建立和优化稳定的ISSR-PCR反应体系。试验采用5因素、4水平的正交试验和单因子梯度优化相结合的方法。通过试验得到适用于根结线虫雌虫的25μL ISSR-PCR反应体系中各因素的最佳浓度分别为dNTPs 0.24 mmol/L、Mg2+2.1 mmol/L、Taq酶0.4 U、引物0.3μmol/L、DNA 140 ng。经引物UBC835、UBC857对根结线虫雌虫最佳ISSR-PCR反应体系验证。该反应体系稳定、可靠,正交结合单因子试验可以建立满足后续试验要求的ISSR-PCR体系。