萝卜ISSR-PCR反应体系的正交设计优化

编号 zgly0001390814

文献类型 期刊论文

文献题名 萝卜ISSR-PCR反应体系的正交设计优化

作者 武创  司龙亭  姜晶 

作者单位 沈阳农业大学园艺学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2010年01期

年份 2010 

分类号 S631.1 

关键词 萝卜  ISSR-PCR  正交设计  反应体系 

文摘内容 本研究利用正交设计L16(45)对萝卜ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化试验。研究结果表明,获得了最佳的反应体系,在10μL反应体系中,含TaqDNA聚合酶0.6U﹑Mg2+2.0mmo/L﹑模板DNA 40ng﹑dNTP 250μmol/L﹑引物0.25μmol/L﹑10×PCRBuffer,不足部分以ddH2O补足。确立了以UBC876为引物的最优反应条件,退火温度为48℃,总循环数为40次。新优化的萝卜ISSR-PCR的反应体系和程序有很好的重复性和稳定性好。此研究为今后利用ISSR技术对萝卜进行种质资源分类﹑遗传图谱构建和基因定位奠定了基础。