意蜂蜂王浆超氧化物歧化酶的分离纯化及部分性质

编号 zgly0001282748

文献类型 期刊论文

文献题名 意蜂蜂王浆超氧化物歧化酶的分离纯化及部分性质

作者 闵丽娥  李佳  刘克武  江琰  刘晓雯  刘鑫 

作者单位 四川大学生命科学学院  四川大学生命科学学院 成都610064  成都610064  成都610064 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2004年02期

年份 2004 

分类号 TS20 

关键词 意大利蜜蜂  蜂王浆  超氧化物歧化酶  分离  纯化  生化性质 

文摘内容 以意蜂Apismellifera蜂王浆为材料 ,经过硫酸铵分段盐析 ,DEAE Sepharose柱层析和SephacrylS 2 0 0凝胶过滤 ,得到纯化的超氧化物歧化酶 (SOD) ,纯化倍数 10 4 0 0 ,比活力 5 3 0 5U mg。该SOD经SDS PAGE显示单一蛋白带。温度对该酶活力的影响较小。Cu、Zn、Fe和Mn等元素含量测定发现该酶只含有Cu和Zn。酶经圆二色谱测定后 ,其α螺旋、β折叠和无规则卷曲蛋白构型的含量分别为 2 6 1%、5 3 8%和 2 2 0 %。等电聚焦电泳测得酶的等电点为 4 6 9、4 85和 5 0 1。NR R单向和双向SDS PAGE表明该酶含有链内二硫键。氨基酸组成分析发现该酶由约 4 0 2个氨基酸残基组成 ,其中Asp、Gly、Leu、Ala、Glu和Val的含量较高。脲可抑制SOD活性 ,并使其紫外光谱发生变化 ,荧光发射峰强度变小。溴乙酸 (BrAc)抑制酶的活力 ,使其紫外光谱发生变化 ,荧光发射峰强度变小。二巯基苏糖醇 (DTT)使酶的活力发生变化 ,紫外吸收峰增大 ,荧光发射峰变小