葡萄柚基因组DNA提取方法的比较及ISSR-PCR体系的优化

编号 zgly0000660670

文献类型 期刊论文

文献题名 葡萄柚基因组DNA提取方法的比较及ISSR-PCR体系的优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 吴田  蓝增全 

作者单位 西南林业大学园林学院  西南林业大学环科系 

母体文献 中国农学通报 

年卷期 2010(23)

页码 48-52

年份 2010 

分类号 S188 

关键词 葡萄柚  DNA提取方法  正交设计  ISSR-PCR 

文摘内容 对4种基因组DNA提取方法进行比较,得到一种效率较高的、且适用于葡萄柚ISSR-PCR的DNA提取方法。同时,采用正交设计对影响葡萄柚ISSR-PCR的因子进行优化。实验结果表明,改良的SDS法提取的基因组DNA最适宜进行葡萄柚的ISSR-PCR扩增。ISSR-PCR产物在2%琼脂糖凝胶上检测,发现PCR扩增的平均条带数为2.7条。葡萄柚的最优ISSR-PCR反应体系为: 20μL总体积中含有2×buffer(Mg2+),0.2mmol/L dNTPs,0.2μmol/L引物,0.3U Taq DNA聚合酶,5ng DNA模板。