灰飞虱高带毒(RSV)群体酵母双杂交cDNA文库的构建

编号 zgly0001399359

文献类型 期刊论文

文献题名 灰飞虱高带毒(RSV)群体酵母双杂交cDNA文库的构建

作者 李硕  孙丽娟  李醒  熊如意  徐秋芳  周益军 

作者单位 南京农业大学植物保护学院  江苏省农业科学院植物保护研究所江苏省植物病毒病诊断检测技术中心 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2011年11期

年份 2011 

分类号 Q78  S433 

关键词 灰飞虱  水稻条纹病毒  同源重组  cDNA文库  酵母双杂交cDNA文库 

文摘内容 为了研究灰飞虱Laodelphax striatellus Fallén与水稻条纹病毒(rice stripe virus,RSV)互作机制,本研究构建了灰飞虱高带毒群体酵母双杂交cDNA文库。以实验室筛选的灰飞虱高带毒群体为材料,分离纯化mRNA,反转录合成双链cDNA,并连接三框型接头,层析柱分级纯化。采用同源重组反应制备三框型cDNA入门文库,再通过同源重组将入门文库转移到Gateway兼容载体pGADT7-DEST上,构建获得酵母双杂交cDNA文库。检测结果表明:文库库容量为3.68×107cfu,扩增文库滴度为2.62×1010cfu/mL;文库重组率大于95%,cDNA插入片段平均长度>1kb,达到了标准cDNA文库的要求。灰飞虱高带毒群体酵母双杂交cDNA文库的构建为开展昆虫介体与水稻条纹病毒互作机制的研究奠定了基础。