道地药材咸丰白术ISSR反应体系优化及多态性引物筛选

编号 zgly0001652516

文献类型 期刊论文

文献题名 道地药材咸丰白术ISSR反应体系优化及多态性引物筛选

作者 卢超  何银生  艾伦强  刘海华  周武先  段媛媛  程天周  张美德 

作者单位 湖北省农业科学院中药材研究所湖北省农业科技创新中心中药材分中心  恩施程丰农业综合开发有限公司 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年22期

年份 2018 

分类号 S567.233 

关键词 ISSR  道地药材  白术  体系优化 

文摘内容 为了得到适宜的咸丰白术ISSR反应体系,采用两轮U12(62×4)均匀设计的方法,对ISSR反应中各组分设置不同的梯度,分析反应体系各组分用量对扩增结果的影响。结果表明,在18μL的ISSR反应体系中,引物0.29μmol/L,2×Taq Master Mix 9.6μL,模板DNA 47 ng时,扩增条带较清晰,多态性好。根据得到的优化体系,进一步开展白术的引物筛选,并从中得到了9条扩增条带相对清晰稳定、多态性较好的引物。对筛选的多态性引物开展了温度梯度PCR实验,发现温度对ISSR-PCR扩增结果影响显著。本实验通过采用均匀设计的方法,降低了常规体系优化实验所需次数,节省了时间和试剂的用量,为快速建立ISSR反应体系和后续咸丰白术遗传多样性分析提供了便利与帮助。