巴西橡胶树叶片蛋白样品的制备及质谱初步分析

编号 zgly0000629203

文献类型 期刊论文

文献题名 巴西橡胶树叶片蛋白样品的制备及质谱初步分析

作者 林秀琴  邓军  袁坤  王真辉  杨礼富 

作者单位 中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学重点开放实验室  海南大学农学院 

母体文献 热带农业科学 

年卷期 2009,29(4)

页码 1-6

年份 2009 

分类号 Q943.2  S794.1 

关键词 巴西橡胶树  蛋白样品  双向凝胶电泳（2-DE）  MALDI-TOF  MS 

文摘内容 采用TCA-丙酮沉淀法并稍做改进提取巴西橡胶树叶片总蛋白，蛋白溶解后，用试剂盒对蛋白上清液进行纯化和浓度测定。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和双向凝胶电泳（2-DE）的结果均表明，所制得的蛋白样品质量较高，并且纯化过的蛋白样品2-DE（双向电泳）图谱效果更好（7cm，考染）。根据预实验结果，选用17cm IPG预制干胶条对纯化的蛋白样品进行2-DE实验，采用快速银染法进行染色，随机挖取银染胶上6个蛋白点进行MALDI-TOF MS分析和数据库检索，鉴定了3个蛋白，它们是：1-氨基环丙烷-1羧酸合酶2，核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶／加氧酶大亚基和F1104．2。本实验为进一步对巴西橡胶树叶片中具有重要生物学功能蛋白的筛选和鉴定打下了方法学基础。