高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

编号 zgly0001652386

文献类型 期刊论文

文献题名 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

作者 高许雷  孙国强  李永锋 

作者单位 青岛市崂山区农业和水利局  青岛农业大学  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2018年11期

年份 2018 

分类号 S852.651 

关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒  基因连续缺失片段  间接ELISA 

文摘内容 为建立一种准确检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的方法,通过对PRRSV基因连续缺失片段dNsp2(87)进行诱导表达,重组pUC57-dNsp2蛋白,经镍柱纯化后,作为抗原包被微量反应板,建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。经反应条件优化,确定抗原的最适包被浓度为40μg/mL,最适封闭液为5%脱脂奶粉,检测血清稀释度为1:40,酶标二抗的最适工作浓度为1:5 000,最佳显色时间为1 h,确定阴阳性临界值为0.35(OD450)。该方法均不与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒(PCV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病毒(PRV)阳性血清发生交叉反应,具有良好的特异性。与IDEXX PRRSV Kit进行重复性、敏感性、符合性试验,证明该方法具有较好的重复性、敏感性、符合性。结果表明,该方法可用于临床PRRSV抗体的检测。