AsiaⅠ型口蹄疫病毒江苏分离株VP1基因的克隆与高效表达

编号 zgly0000556593

文献类型 期刊论文

文献题名 AsiaⅠ型口蹄疫病毒江苏分离株VP1基因的克隆与高效表达

作者 陈昌海  程雷  徐正军  郝桂兰  刘耀兴  袁日进  陆承平 

作者单位 南京农业大学动物医学院  江苏省畜牧兽医总站 

母体文献 西北农林科技大学学报 

年卷期 2008,36(7)

页码 9-13

年份 2008 

分类号 S852.653 

关键词 AsiaⅠ型口蹄疫病毒  VP1基因  原核表达 

文摘内容 【目的】实现牛口蹄疫病毒AsiaⅠ型江苏分离株VP1基因在大肠杆菌中的表达，为VP1蛋白的深入研究奠定基础。【方法】根据GenBank公布的AsiaⅠ型口蹄疫病毒(Foot-and—MouthDiseaseVirus，FMDV)核苷酸序列(登录号：AF030244)，设计并合成1对特异性引物，应用RT—PCR方法扩增出牛AsiaⅠ型FMDV江苏分离株忡1基因，将其连接人pMD18-T载体，测序后克隆人原核表达载体pET-32a(＋)中，构建原核表达载体pET—VP1。阳性重组质粒转化感受态大肠杆菌BL21(DE3)，用IPTG进行诱导表达，收集表达产物并进行SDS-PAGE电泳，利用West-ern—blot分析表达蛋白的抗原性。【结果】牛AisaⅠ型FMDV VP1基因在大肠杆菌中获得高效表达，表达产物的相对分子质量约为43ku，并能被牛AsiaI型FMDV阳性血清识别，有一定的生物学活性，表达量约占菌体蛋白总量的37．7％。【结论】牛AsiaⅠ型FMDV VP1基因表达成功，且表达产物具有一定的生物学活性。