谷胱甘肽硫转移酶与hEGF在大肠杆菌中的融合表达及活性研究

编号 zgly0000513948

文献类型 期刊论文

文献题名 谷胱甘肽硫转移酶与hEGF在大肠杆菌中的融合表达及活性研究

作者 吴方丽  金伟波  王保莉 

作者单位 西北农林科技大学生命科学学院  西北农林科技大学b植物保护学院 

母体文献 西北农林科技大学学报 

年卷期 2007,35(8)

页码 175-179

年份 2007 

分类号 Q813.2 

关键词 表皮生长因子  pGEX-4T-1  BL21-CodonPlusTM-RP  分离纯化  生物学活性 

文摘内容 为了得到具有生物学活性的人表皮生长因子(hEGF),将含有人表皮生长因子基因的原核表达载体pGEX-4t-1(＋)-hEGF转化入BL21-CodonPlus^TM-RP表达宿主菌进行大量表达,SDS-PAGE分析表明,融合蛋白主要以包涵体的形式存在。收集包涵体,用氧化复性的方法,加入还原型的谷胱甘肽进行复性,之后通过Glutathione Sepharose^TM4B纯化柱,分离纯化得到复性的融合蛋白。以兔抗人EGF单克隆抗体为一抗,进行Western blotting鉴定,证明分离纯化得到的融合蛋白含有目的蛋白hEGF。最后对复性的融合蛋白进行了活性分析,表明该融合蛋白具有良好的hEGF生物学活性。