葛仙米中SOD基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

编号 zgly0000577593

文献类型 期刊论文

文献题名 葛仙米中SOD基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

作者 汪滢  章秀  吴双秀  王全喜 

作者单位 上海师范大学生命与环境科学学院 

母体文献 上海师范大学学报：自然科学版 

年卷期 2008,37(3)

页码 301-304

年份 2008 

分类号 Q785  Q949.225 

关键词 葛仙米  SOD基因克隆  诱导表达 

文摘内容 采用PCR技术从葛仙米(Nostoc sphaeroides)总DNA中克隆了一段基因序列，该序列与基因库中已公布的编码普通念珠藻(Nostoc commnue)超氧化物歧化酶的氨基酸序列同源性为98％,将该基因插入含T7启动子的质粒pET-32a(＋)中构建表达质粒pET-sod，然后将该表达质粒转入大肠杆菌BL21中进行蛋白表达，表达菌株用lmmol／L1PTG诱导表达数小时后，产生较多重组的蛋白，且该蛋白以可溶性蛋白形式存在,SDS-PAGE分析表明：在相对分子量约为22kd的位置有一条明显蛋白质带,将诱导表达后的蛋白通过亲和层析的方法进行蛋白纯化；NBT光还原法测定表达产物的比活力，每毫克纯化蛋白约为2550U。