草鱼BAC文库中TLR3基因的筛选及表达特征的研究

编号 zgly0001392970

文献类型 期刊论文

文献题名 草鱼BAC文库中TLR3基因的筛选及表达特征的研究

作者 杨春荣  苏建国  张荣芳  董捷  汪亚平  张成勋 

作者单位 西北农林科技大学陕西省农业分子生物学重点实验室  中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2010年06期

年份 2010 

分类号 S965.112 

关键词 草鱼  BAC文库  TLR3基因  基因表达 

文摘内容 【目的】从草鱼的BAC文库中筛选TLR3基因的阳性克隆,研究该基因在草鱼体内的表达规律,为进一步研究奠定基础。【方法】用同位素P32标记的探针,对53 216个BAC克隆以双份平行形式制备的DNA尼龙膜进行杂交筛选,用半定量方法检测TLR3在草鱼不同组织(鳃、心脏、肠、肝胰脏、肌肉、皮肤、脾脏、头肾和中肾)中的表达模式,用实时荧光定量RT-PCR研究草鱼感染呼肠孤病毒后不同时间TLR3的表达规律。【结果】获得了2个TLR3基因的阳性BAC克隆,该基因在被检测的9个组织中都有表达,其中在脾脏、皮肤中的表达量较高。在感染呼肠孤病毒后24 h,草鱼肝胰脏中TLR3的相对表达量显著升高(P<0.05);感染后48 h,其相对表达量恢复到正常水平(P>0.05)。【结论】成功筛选到草鱼TLR3的BAC克隆,该基因在草鱼体内不同组织中有广泛表达,并且参与了草鱼抗呼肠孤病毒的过程。