琯溪蜜柚高分量核DNA提取方法的建立

编号 zgly0001380118

文献类型 期刊论文

文献题名 琯溪蜜柚高分量核DNA提取方法的建立

作者 潘腾飞  陈桂信  潘东明 

作者单位 福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所  园艺学院 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2010年05期

年份 2010 

分类号 S666.3 

关键词 柚  高分子量核DNA  BAC文库  脉冲场电泳 

文摘内容 以琯溪蜜柚[Citrus grandis(L.)Osbeck’Guanximiyou’]叶片为材料,比较了两种提取方法对高分子量核DNA(HMW-DNA)制备效果的影响。结果表明,改良Zhang法与Peterson法相比,前者更适合于琯溪蜜柚HMW-DNA的提取。改良Zhang法用温和的物理方法破碎细胞壁,在一定的渗透压下保证细胞核的完整性,运用miracloth和低速离心去除大部分的多糖和细胞壁碎片,经显微观察,所提取的细胞核完整、纯净、质量高;将这些细胞核用低熔点琼脂糖包埋,以琼脂糖小块的方式保存细胞核,以保持核的稳定;琼脂糖小块的最适消化时间为48h,脉冲场凝胶电泳分析结果表明所获得的HMW-DNA大于1Mb,这些核DNA能够被限制性内切酶消化,适合于琯溪蜜柚BAC基因组文库的构建。