编号 zgly0000790922
文献类型 期刊论文
文献题名 芜菁UF3GT基因的克隆及表达特性
学科分类 220.1520;林木遗传学
作者单位 东北林业大学生命科学学院
母体文献 生物技术通讯
年卷期 2012,23(2)
页码 232-237,266
年份 2012
分类号 Q943.2
关键词 芜菁 UDP-葡萄糖: 类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶 基因克隆 序列分析 基因表达
文摘内容 目的: 克隆‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁的UDP-葡萄糖: 类黄酮3-0-葡萄糖基转移酶(UF3GT)基因并研究其表达特性。方法: 利用RT-PCR方法克隆‘津田’芜菁BrUF3GTl基因和‘赤丸’芜菁BrUF3GT2基因, 并进行生物信息学分析; 通过Northern杂交检测BrUF3GTl和BrUF3G死基因的UV-A诱导表达特性; 对BrUF3GTl和研U乃G他基因进行原核诱导表达。结果: BrUF3GTl和BrUF3GT2的开放读框为1407bp, 编码468个氨基酸残基; 氨基酸序列分析显示, BrUF3GTl和BrUF3GT2与拟南芥UF3GT的同源性为87%, 从第16~453位氨基酸残基的肽段具有糖基转移酶家族成员的结构域; 所UF3G丌和BrUF3GT2基因具有高度同源性, 核苷酸序列在7个位点存在差异, 推导的氨基酸序列在1个位点存在差异; Northern杂交结果显示, UV-A可以诱导西"3G"和BrUF3GT2基因表达, 基因的表达量与处理时间相关; 原核诱导表达及纯化后可以获得相对分子质量分别约为51.88×10。和51.89~10。的BrUF3GTl和BrUF3GT2蛋白。结论: 克隆了‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁的叩3Gr基因, 为初步阐明2种芜菁的花青素生物合成机理奠定了实验基础。