利用酵母双杂交技术筛选鉴定STCH与RanBP9的相互作用

编号 zgly0000582761

文献类型 期刊论文

文献题名 利用酵母双杂交技术筛选鉴定STCH与RanBP9的相互作用

作者 吕立夏  李学礼  谷辉杰  郑莉  李静琪  徐磊 

作者单位 同济大学医学院基础医学院生物化学教研室  同济大学医学院2003级学生  同济大学医学院32005级学生 

母体文献 神经解剖学杂志 

年卷期 2008,24(1)

页码 48-52

年份 2008 

分类号 Q78  S637.2 

关键词 酵母双杂交  STCH  人脑 

文摘内容 以人应激和分子伴侣蛋白(STCH)为诱饵蛋白，利用酵母双杂交技术在高严格条件下筛选人脑cDNA文库。在SD／-4培养基上共获得156个阳性克隆，将酵母菌扩增后抽提质粒，转化大肠杆菌，进行序列分析，并经过回复杂交验证，潜在的与STCH相互作用的蛋白有：VDAC、MBP2、ZNF251、RanBP9、Phosophate glycolase、β—tubulin、up1、up2和WW adaptor蛋白。基于各候选蛋白与神经系统疾病的关系，选择RanBP9作进一步验证实验。经体外GST—Pulldown和体内免疫共沉淀实验证实RanBP9和STCH能够相互作用，明确RanBP9的羧基端为相互作用的最小功能域。此结果为我们进一步揭示STCH作用的分子机制提供了线索。