紫杉烷14β-羟基化酶基因片段的克隆及其植物表达载体的构建

编号 zgly0000391866

文献类型 期刊论文

文献题名 紫杉烷14β-羟基化酶基因片段的克隆及其植物表达载体的构建

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 胡新玲  徐妙云  刘德虎  邱德有 

作者单位 中国林业科学研究院林业研究所  中国农业科学研究院生物技术所 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2006,4(2)

页码 243-250

年份 2006 

分类号 Q943.2  Q782 

关键词 紫杉烷14β-羟基化酶  RNA干扰  反义RNA  表达载体构建 

文摘内容 采用CTAB法提取中国红豆杉基因组DNA, 利用PCR技术克隆得到紫杉烷14β-羟基化酶(简称140H)基因前半段, 测序结果表明DNA片段序列为915bp, 与报道的140H基因同源性为98.3%。然后将获得的DNA片段(915bp)正反向插入到二元载体pZh01的GUS两端, 构建成140HRNAi植物表达载体pZl4a, 又选其中与羟基化酶家族其他成员同源性低的部分(390bp), 正反向插入到二元载体pZh01的GUS两端, 构建成140HRNAi植物表达载体pZ14b。同时将克隆得到的DNA片段(915bp)反向插入到二元载体pZh01中, 构建成140H反义RNA植物表达载体pZ14c。经PCR和酶切图谱分析鉴定, 确认载体构建成功。