人β4GalTⅡ基因在哺乳动物细胞株中的表达与定位

编号 zgly0000918648

文献类型 期刊论文

文献题名 人β4GalTⅡ基因在哺乳动物细胞株中的表达与定位

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 徐雪琴  潘林鑫  耿慧武  刘晓颖  范礼斌 

作者单位 安徽医科大学生命科学学院生物学教研室 

母体文献 安徽医科大学学报 

年卷期 2015(11)

页码 1610-1614

年份 2015 

关键词 β4Gal TⅡ  转染  细胞定位  蛋白表达 

文摘内容 目的运用基因克隆技术构建人源β1,4-半乳糖转移酶Ⅱ(β4Gal TⅡ)真核表达质粒,并将其转染到COS7细胞中,观察蛋白在细胞内的定位,同时转染到HEK 293T细胞中检测其表达。方法分别设计带FLAG标签和GFP标签的β4Gal TⅡ基因的特异性引物,以含人β4Gal TⅡ全长c DNA序列为模板,定向构建到pc DNA3.1(+)及p CDGFP真核表达载体中,构建重组表达质粒。通过酶切和测序鉴定阳性重组质粒,利用Lipofectamine 2000分别转染COS7、HEK 293T细胞,免疫荧光显微镜观察重组蛋白在细胞内的定位,Western blot法鉴定重组蛋白的表达。