大叶栎ISSR扩增体系的优化

编号 zgly0000625971

文献类型 期刊论文

文献题名 大叶栎ISSR扩增体系的优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 梁文汇  谭健晖  黄寿先  梁机  谢素平  刘光金  黄婷  周传明 

作者单位 广西大学林学院  广西林业科学研究院 

母体文献 安徽农业科学 

年卷期 2009,37(22)

页码 10424-10425,10428

年份 2009 

分类号 S792.18 

关键词 大叶栎  ISSR  反应体系  优化 

文摘内容 [目的]探讨影响大叶栎ISSR扩增效果的因素，建立大叶栎ISSR扩增的优化体系。[方法]以新嫩的大叶栎叶片为试材，采用改良CTAB法提取大叶栎叶片基因组DNA，并将DNA浓度稀释到30ng／μl，采用单因素试验设计测试DNA模板、PCR缓冲液和TaqDNA聚合酶的用量以及底物dNTP终浓度和引物终浓度对ISSR扩增的影响。[结果]大叶栎的ISSR扩增的最优反应体系为：总体积20μl中含有DNA模板60ng、PCR缓冲液10×buffer为2．0μl，底物dNTP终浓度为0．25mmol／L，引物终浓度为0．3μmol／L，TaqDNA聚合酶为1U。在该体系下，能够扩增出清晰、多态性高的条带，能够满足大叶栎种群ISSR多样性分析的要求。[结论]建立了大叶栎ISSR扩增的优化体系，为研究广西的大叶栎种群遗传多样性提供了技术基础。