基于RPA的鲤春病毒血症病毒核酸检测技术的建立与评价

编号 zgly0001705877

文献类型 期刊论文

文献题名 基于RPA的鲤春病毒血症病毒核酸检测技术的建立与评价

作者 田城城  兰文升  叶仕根 

作者单位 大连海洋大学水产与生命学院  深圳海关动植物检验检疫技术中心深圳市检验检疫科学研究院 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2020年02期

年份 2020 

分类号 S851.34 

关键词 重组酶聚合酶扩增技术  鲤春病毒血症病毒  核酸检测  评价 

文摘内容 重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)是近几年新发展并普及应用的一种核酸扩增技术,能够实现检测设备小型化,从而满足现场诊断(point-of-care testing,POCT)的需求。本研究以鲤春病毒血症病毒(springviraemiaofcarp virus,SVCV)为检测靶标,建立了SVCV的RPA检测技术,并分析了该方法的灵敏性、特异性和稳定性,评判了该技术应用于POCT的可能性。结果表明:基于RPA的检测方法灵敏度较高,检测下限可达4×10~3 PFU/mL,但比以Taq酶为基础的RT-PCR技术略低;特异性好,未发现对其他水生动物疫病病原,如传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)、传染性鲑鱼贫血病病毒(ISAV)等发生非特异性反应;稳定性良好,3次重复性试验的结果近乎一致。试验证明,该方法能够替代RT-PCR技术,应用于POCT的试剂和仪器设备研发。