林麝粪便基因组DNA的提取及PCR扩增

编号 zgly0001533091

文献类型 期刊论文

文献题名 林麝粪便基因组DNA的提取及PCR扩增

作者 康强  周鑫  罗燕  田青  程建国  赵位 

作者单位 四川农业大学森林资源保护与利用实验室  四川农业大学微生物学实验室  四川农业大学动物医学院  四川养麝研究所 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2016年11期

年份 2016 

分类号 S865.41 

关键词 林麝  粪便  线粒体DNA  D-loop区  Cyt b基因 

文摘内容 【目的】探索从林麝粪便中提取基因组DNA并进行物种鉴定的可行性,为林麝野外调查工作以及分子粪便学在林麝保护中的应用提供科学依据。【方法】采集林麝粪便,采用改良的CTAB抽提基因组DNA;按常规PCR法对mtDNA D-loop区和Cyt b基因进行扩增测序后,用DNAMAN 6.0软件进行系统发育分析;在不同温度存放不同时间,研究林麝粪便基因组DNA的提取与mtDNA D-loop区和Cyt b基因PCR扩增的时效性。【结果】以提取的基因组DNA为模板进行PCR扩增均能特异性地扩增出mtDNA D-loop区和Cyt b基因。系统发育分析结果表明:所扩增产物为林麝的mtDNA D-loop区和Cyt b基因。时效性分析结果显示:常温和4℃条件下保存96h以内的林麝粪便所提取的基因组DNA能有效扩增出mtDNA D-loop区和Cyt b基因。【结论】自然条件下林麝粪便中林麝自身体细胞DNA保存时间较长,通过在野外采集林麝粪便提取基因组DNA并进行物种鉴定是可行的。