正交设计优化油松ISSR-PCR反应体系

编号 zgly0000862018

文献类型 期刊论文

文献题名 正交设计优化油松ISSR-PCR反应体系

学科分类 220.1070;森林植物学

作者 王树香  李明  高宝嘉 

作者单位 河北农业大学生命科学学院  河北农业大学林学院 

母体文献 江苏农业科学 

年卷期 2014(7)

页码 46-49

年份 2014 

关键词 油松  分子标记  ISSR-PCR  反应体系  正交设计 

文摘内容 采用正交设计的方法对油松ISSR-PCR反应体系5因素(Taq DNA聚合酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物的浓度)在4水平上进行优化试验,PCR结果用SPSS数据软件分析。结果表明:各因素不同水平对PCR反应结果都有显著的影响,且除dNTP因素外其他4因素影响均较大;筛选出各反应因素的最佳水平,建立油松ISSR-PCR的最佳反应体系(20μL)为:Taq DNA聚合酶1 U、模板5μg/μL、Mg2+2.0 mmol/L、dNTP 0.20 mmol/L、引物0.4μmol/L;进行梯度退火试验,筛选出针对不同引物的最适的油松ISSR退火温度。