miRNA干扰gM基因对马立克氏病病毒体外复制的抑制作用

编号 zgly0001362642

文献类型 期刊论文

文献题名 miRNA干扰gM基因对马立克氏病病毒体外复制的抑制作用

作者 张鑫宇  何玲  袁维峰  孙怀昌 

作者单位 扬州大学兽医学院 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2009年02期

年份 2009 

分类号 S852.65 

关键词 miRNA  马立克氏病病毒  病毒复制  抑制 

文摘内容 用miRNA Target Finder分析软件预测干扰RB1B株马立克氏病病毒(Marek’s Disease Virus,MDV)gM基因翻译的潜在靶序列,从中筛选出3个作为干扰对象,根据干扰载体pRFPRNAiC特点,设计合成3对单链DNA序列,经PCR反应扩增出双链DNA,并将其插入干扰载体pRFPRNAiC,构建重组干扰质粒pRFPRNAiCgM1、pRFPRNAiCgM2、pRFPRNAiCgM3。将质粒pRFPRNAiCgM1以不同的剂量转染鸡胚成纤维(CEF)细胞,确定最佳转染质粒量,试验结果表明1μg转染剂量转染效果最佳。以1μg剂量将3种重组干扰质粒分别转染CEF细胞,24h后感染RB1B株MDV,72h后用空斑计数MDV在CEF细胞上增殖数量,以此判定miRNA干扰效果,结果显示,重组干扰质粒中质粒pRFPRNAiCgM2干扰效果较好,能有效抑制MDV在CEF上的生长繁殖。