虎源传染性鼻气管炎病毒巢式PCR检测方法的建立

编号 zgly0001486832

文献类型 期刊论文

文献题名 虎源传染性鼻气管炎病毒巢式PCR检测方法的建立

作者 李林翔  韦增晖  张晓明  彭仕明  陈武 

作者单位 苏州市动物园  广东工业大学  广州动物园  广州海洋馆 

母体文献 野生动物学报 

年卷期 2015年04期

年份 2015 

分类号 S852.65 

关键词 虎源传染性鼻气管炎病毒  巢式PCR  一步法PCR  gD基因 

文摘内容 为了建立虎源传染性鼻气管炎病毒巢式PCR(nested PCR)的快速鉴定方法,根据虎源传染性鼻气管炎病毒(FHV-1)的gD蛋白基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性和重复性实验,特异性试验表明,该方法可以特异扩增出FHV-1的gD基因片断,从猫泛白细胞减少症病毒、猫支原体和阴性对照的VERO细胞均未扩增出该条带,敏感性试验表明,nested PCR检测极限是1×10~2 copies/μl,而一步法PCR的有效扩增最低极限是1×10~5 copies/μl,前者的敏感性明显高于后者,重复性实验表明,不同情况下3次重复性试验,结果相同。用nested PCR对疑似感染FHV-1的样品进行检测,实验结果与病毒分离鉴定结果一致。本研究建立的nested PCR适用于野生猫科动物FHV-1感染的快速诊断与流行病学调查。