利用转基因番茄表达人成纤维细胞生长因子21(FGF21)

编号 zgly0001412435

文献类型 期刊论文

文献题名 利用转基因番茄表达人成纤维细胞生长因子21(FGF21)

作者 付宏岐  李海燕  庞实锋  杨晶  李洪志  薛萍  刘秀明  李营  王艳芳  李校堃 

作者单位 吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心  吉林农业大学中药材学院  吉林农业大学生命科学学院  广东医学院生物教研室  牡丹江医学院  吉林市农业科学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2011年07期

年份 2011 

分类号 Q943.2  S188 

关键词 农杆菌  成纤维细胞生长因子-21  甘露糖-6-磷酸异构酶  生物反应器  番茄  遗传转化 

文摘内容 【目的】在番茄中表达人成纤维细胞生长因子-21(Fibroblast growth factor-21,FGF21),为利用植物反应器规模化生产FGF21奠定基础。【方法】以甘露糖-6-磷酸异构酶基因(pmi)作为转基因植物的选择标记,将人源fgf21基因克隆至表达载体pCAMBIA1390RⅡ(简写为p1390RⅡ)上,构建重组表达质粒p1390 RⅡMFGF21。采用冻融法将质粒p1390RⅡMFGF21转入根瘤农杆菌EHA105,叶盘法转化番茄(Lycopersicon esculentum)中蔬6号,采用PCR检测、Southern杂交筛选转基因番茄阳性植株,并对FGF21蛋白在转基因番茄叶片中的表达进行了Western blot分析。【结果】成功构建了带pmi安全选择标记基因的植物双元表达载体p1390RⅡMFGF21,在番茄中初步建立了以pmi为选择标记基因的遗传转化体系,共获得了26株转基因番茄植株,其中5株为阳性克隆,转化率为19.2%。采用PCR扩增和Southern blot分析进行检测,结果表明,重组fgf21基因已整合到转基因番茄基因组中。Western blot分析检测结果显示,FGF21蛋白在转基因番茄叶片中有一定水平的表达,并具有良好的抗原性。【结论】获得了以pmi为选择标记成功表达FGF21蛋白的转基因番茄遗传体系。