农杆菌介导的成纤维细胞生长因子-21基因转化甘蓝型油菜研究

编号 zgly0001392972

文献类型 期刊论文

文献题名 农杆菌介导的成纤维细胞生长因子-21基因转化甘蓝型油菜研究

作者 李营  庞实锋  薛萍  刘秀明  付宏岐  李洪志  熊丽东  潘国庆  李海燕  李校堃 

作者单位 吉林农业大学生物反应器与药物研发教育部工程研究中心  吉林农业大学生命科学学院  广东医学院生物教研室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2010年08期

年份 2010 

分类号 S565.4 

关键词 成纤维细胞生长因子-21  甘蓝型油菜  生物反应器  转基因  农杆菌 

文摘内容 【目的】利用基因工程技术获得FGF21转基因油菜植株,为FGF21蛋白生产体系的建立奠定基础。【方法】将人源FGF21基因的cDNA序列,根据植物偏好密码子进行改造,并通过PCR拼接技术扩增FGF21全长基因,将该基因插入油菜油体特异表达载体,通过冻融法转到根瘤农杆菌LBA4404,叶盘法转化甘蓝型油菜沪油15,并对转基因油菜进行PCR检测和Southern blot分析,最后对FGF21蛋白在转基因油菜种子中的表达的进行了Western blot分析。【结果】合成了FGF21全长基因,成功构建了含FGF21基因的植物双元表达载体p1390yoFGF21,并建立了油菜遗传转化体系。通过油菜遗传转化获得2株转基因植株,PCR扩增和Southern blot检测证实,重组FGF21基因已整合到油菜基因组中;Western blot分析检测显示,FGF21在转基因油菜种子蛋白中具有一定水平的表达量,并具有良好的抗原性。【结论】FGF21基因被成功整合到油菜基因组中,收获的T0代种子蛋白具有良好的抗原性。