利用噬菌体展示技术筛选Cry2Ab毒素受体表位的方法

编号 zgly0001422023

文献类型 期刊论文

文献题名 利用噬菌体展示技术筛选Cry2Ab毒素受体表位的方法

作者 齐佳  刘晨曦  吴孔明 

作者单位 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室 

母体文献 应用昆虫学报 

年卷期 2012年05期

年份 2012 

分类号 S482.39 

关键词 噬菌体展示  表位筛选  Cry2Ab 

文摘内容 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)产生的内毒素具有杀虫活性,Cry2Ab毒素作为Bt棉花的杀虫活性蛋白,其在靶标昆虫体内的结合受体及作用位点尚不清楚,本研究采用噬菌体展示(phage display)的方法,经4轮的吸附—洗脱—扩繁筛选,并对阳性克隆所携带的外源DNA片段进行序列测定后,得到2段能够与活化Cry2Ab毒素相互作用的多肽序列,通过酶联免疫结合试验(ELISA)进一步证明,这2段多肽序列与活化Cry2Ab毒素具有较高的亲和力和特异性,结果表明,利用该方法能够由噬菌体随机肽库中高效捕获亲和序列,筛选到与活化Cry2Ab毒素具有高亲和力的多肽,该序列可以模拟Cry2Ab毒素的受体表位,为进一步研究Cry2Ab毒素作用机制奠定了基础,并为今后田间抗性基因频率检测,以及毒素—受体作用机制研究工作提供更有力的技术支持。