珍稀植物攀枝花苏铁ISSR扩增条件的优化

编号 zgly0000493942

文献类型 期刊论文

文献题名 珍稀植物攀枝花苏铁ISSR扩增条件的优化

作者 张颖  雷泞菲  徐莺  陈放 

作者单位 四川大学生命科学院  成都理工大学材料与化学学院 

母体文献 中国农学通报 

年卷期 2007,23(4)

页码 74-77

年份 2007 

分类号 Q341 

关键词 攀枝花苏铁  ISSR  影响因子  PCR  反应体系 

文摘内容 在利用ISSR技术对攀枝花苏铁( Cycas panzhihuaensis )种质资源遗传多样性进行研究的实验过程中, 对影响PCR扩增效果的一些因素如DNA的提取、模板DNA质量浓度、Taq酶用量、引物用量、dNTP的用量以及退火温度等指标进行筛选和优化。试验结果表明, 20μl的反应体系中采用15-25ng的模板DNA、2.0～2.5mmol/L的Mg^2+浓度、0.2mmol/L的dNTPs、0.2μmol/LISSR引物、0.2U TagDNA聚合酶、48℃-55℃(退火温度随引物不同而定)的复性温度, 以及35个循环数为攀枝花苏铁ISSR—PCR扩增条件的最佳选择。攀枝花苏铁ISSR—PCR扩增条件的优化为进行攀枝花苏铁种群间遗传分化的研究奠定了基础。