布鲁氏菌野毒株A544和疫苗株104M差异蛋白的表达及抗体制备

编号 zgly0001557823

文献类型 期刊论文

文献题名 布鲁氏菌野毒株A544和疫苗株104M差异蛋白的表达及抗体制备

作者 王海艳  赵林立  赵治国  郭文秀  陈宇飞  刘佳  任彩霞  敖威华  马彩霞 

作者单位 内蒙古出入境检验检疫局 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2017年10期

年份 2017 

分类号 S852.4 

关键词 差异蛋白  布鲁氏菌野毒株A544  布鲁氏菌疫苗株104M  表达  抗体制备 

文摘内容 选取布鲁氏菌差异蛋白部分基因序列,将其克隆到表达载体p GEX-6p-1中;经PCR鉴定、酶切鉴定和序列测定,得到重组质粒p GEX-6p-1-bru;将重组质粒转化到Rosetta(DE3)感受态细胞中,用1 mmol/L异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)对转化菌进行诱导表达,并用表达蛋白制备多克隆抗体。结果:差异蛋白在体外获得了高效表达,表达融合蛋白分子量约为35 k D;诱导5 h后表达量最高,占菌体总蛋白的30%左右;表达蛋白能与多克隆抗体发生免疫印迹反应,证明所表达的蛋白具有良好的免疫原性。该研究结果为免疫学检测方法的建立奠定了基础。