家蚕微孢子虫荧光定量PCR检测方法及诊断试剂盒

编号 zgly0001399679

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕微孢子虫荧光定量PCR检测方法及诊断试剂盒

作者 何永强  吴姗  鲁兴萌  张弘  邱海洪  帅江冰  王素华  张晓峰  徐国群  李光才  董强 

作者单位 浙江出入境检验检疫局技术中心  浙江大学动物科学学院  浙江中医药大学第一附属医院 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2011年02期

年份 2011 

分类号 S884.21 

关键词 家蚕微孢子虫  荧光定量PCR  诊断试剂盒 

文摘内容 基于为蚕种生产与流通贸易提供快速、灵敏、准确检测家蚕微孢子虫的方法,以家蚕微孢子虫小亚单位核糖体RNA基因66 bp片段作为靶标,设计特异性引物和TaqMan探针,用构建的重组质粒制备标准品进行荧光定量PCR扩增,通过优化PCR反应体系,测定线性范围,评价方法的特异性、灵敏度和重复性,成功构建了家蚕微孢子虫的荧光定量PCR检测方法,并研制出诊断试剂盒。该方法的检测线性范围为1×108～1×102拷贝/mL的7个线性梯度,检测家蚕微孢子虫的敏感度达1×102拷贝/mL,特异性高,3次重复性检测应用试验的批内变异系数为3.6%～7.2%,批间变异系数为5.2%～7.8%。结果表明,建立的家蚕微孢子虫荧光定量PCR检测方法具有准确、灵敏、快速、特异性强的特点。