PCV-2 ORF2基因的真核表达及其体内分布和安全性检测

编号 zgly0001340219

文献类型 期刊论文

文献题名 PCV-2 ORF2基因的真核表达及其体内分布和安全性检测

作者 谢丽基  谢芝勋  唐小飞  刘加波  庞耀珊  邓显文  谢志勤 

作者单位 广西兽医研究所  广西兽医研究所 广西南宁530001  广西南宁530001 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2008年04期

年份 2008 

分类号 S852.5 

关键词 猪圆环病毒2型  ORF2基因  pcDNA3.1(+)  免疫保护 

文摘内容 根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因序列,设计了1对引物,应用PCR从广西PCV-2的DNA扩增出ORF2基因,将ORF2基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)载体上,获得重组质粒,经PCR酶切以及序列分析鉴定,表明插入的片段为ORF2目的基因,插入的位置、大小和阅码框均正确,成功构建了真核表达载体重组质粒pcDNA-PCV-ORF2。对阳性真核表达质粒pcDNA-PCV-ORF2大量抽提后,以每只小鼠0.2 mg免疫5周龄左右的雌性小鼠,然后用ELISA检测免疫小鼠血清中抗体的产生情况,同时进行pcDNA-PCV-ORF2的体内分布和安全性检测。结果表明,pcDNA-PCV-ORF2在小鼠体内广泛存在,产生了抗猪圆环病毒的特异性抗体,从第7天开始产生抗体,第28天抗体水平达到最高,抗体可维持7周以上,并具有良好的安全性。本研究通过对小鼠的免疫试验,产生了猪圆环病毒的特异性抗体,表明成功构建了能够在活体细胞中高效表达的真核表达载体,为进一步研究猪圆环病毒DNA疫苗奠定了基础。