山鸡椒LcGPPS表达模式及其与LcGGPPS蛋白互作分析

编号 zgly0001570255

文献类型 期刊论文

文献题名 山鸡椒LcGPPS表达模式及其与LcGGPPS蛋白互作分析

作者 曹佩  陈益存  高暝  郭浩波  汪阳东 

作者单位 中国林业科学研究院亚热带林业研究所  美国田纳西大学生物化学系 

母体文献 林业科学研究 

年卷期 2017年06期

年份 2017 

分类号 S792.99 

关键词 山鸡椒  萜类合成  GPPS  GGPPS  异质二聚体  蛋白互作  表达模式 

文摘内容 [目的]鉴定与山鸡椒精油合成关键酶香叶基二磷酸合酶(LcGPPS)的互作蛋白,为揭示山鸡椒精油主要成分单萜物质的合成机理奠定基础。[方法]通过本地Blast搜索山鸡椒果实转录组数据库,采用RT-PCR克隆山鸡椒GPPS基因(编码异质GPPS小亚基的LcGPPS.SSU1)和山鸡椒GGPPS基因(LcGGPPS1和LcGGPPS3);利用qRTPCR分析其组织特异性表达模式,通过蛋白互作预测和酵母双杂实验验证LcGPPS.SSU1分别与LcGGPPS1和LcGGPPS3的互作关系。[结果]克隆得到LcGPPS.SSU1、LcGGPPS1和LcGGPPS3 3条基因序列,基因表达模式分析表明,LcGPPS.SSU1特异性地在花和果实中高水平表达;蛋白结构互作预测结果显示,LcGPPS.SSU1可以分别与LcGGPPS1和LcGGPPS3互作形成异质二聚体;经过酵母双杂交实验验证发现,仅LcGGPPS3能与LcGPPS.SSU1发生互作。[结论]LcGPPS.SSU1通过与LcGGPPS3蛋白发生互作从而在山鸡椒萜类合成途径中发挥作用,为深入研究山鸡椒萜类合成机制提供参考。