菠菜胆碱单氧化酶(CMO)基因的克隆及在大肠杆菌中的诱导表达

编号 zgly0000320275

文献类型 期刊论文

文献题名 菠菜胆碱单氧化酶(CMO)基因的克隆及在大肠杆菌中的诱导表达

作者 蒋湘宁  YillSungPark 

作者单位 北京林业大学生物科学与技术学院  加拿大林务局大西洋林业中心 

母体文献 北京林业大学学报 

年卷期 2003,25(1)

页码 6-9

年份 2003 

分类号 Q554 

关键词 菠菜  CMO  胆碱单氧化酶  基因克隆  基因表达  甘氨酸甜菜碱  抗逆性 

文摘内容 甘氨酸甜菜碱是一种非毒性的渗透调节物质, 在植物体内是以胆碱为底物, 经两步氧化而合成的。菠菜中, 催化第一步反应的酶为胆碱单氧化酶(Choline Monooxygenase,CMO)。为了研究胆碱单氧化酶基因的功能以及转基因植物的抗逆能力, 在300mmol/L高盐浓度(n(NaCl):n(CaCl2)=5.7:1)的条件下, 作者分离纯化了菠菜mRNA, 经RT-PCR得到全长(1.3kb)胆碱单氧化酶(CMO)cDNA, 与已经报道的基因序列相比较, 同源性为99%。根据其核苷酸序列推导得到了氨基酸序列。将PCR纯化产物与pET-30a^+连接, 构建了重组表达载体pETCMO, 并转化到大肠杆菌BL21(DE3), 经IPTG诱导获得高效表达。