编号
zgly0000612980
文献类型
期刊论文
文献题名
月季SSR-PCR反应体系的建立和优化
学科分类
220.5010;园林植物学
作者单位
北京林业大学园林学院
母体文献
华北农学报
年卷期
2009,24(3)
页码
184-188
年份
2009
分类号
S685.12
关键词
月季
SSR
正交试验
反应体系
文摘内容
采用L16(54)正交设计和二因素完全随机试验,分析了月季SSR-PCR反应体系的主要成分TaqDNA聚合酶、样本浓度、Mg2+浓度d、NTP浓度以及引物浓度对扩增结果的影响,建立了适合月季的SSR反应体系。研究结果表明:在20μL反应体系中,TaqDNA聚合酶宜加入1.5 U,样本最适宜浓度为30-40 ng,Mg^2+的最适浓度为1-1.5 mmol/L,dNTP最适浓度为0.2 mmol/L,单引物的最适浓度均为1μmol/L。用建成的反应体系对19对引物筛选,对12个月季品种扩增,3%的琼脂糖凝胶电泳检测,品种间DNA谱带多态性丰富,证明该体系稳定可靠。